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1概述

對于某些應用場景，只有少量樣品可用于使用多種技術進行分析。在制藥研究中，擁有 1 ml或更少蛋白質樣品并需要進行多次分析并不罕見。AccuSizer? 能使用小體積測量顆粒大小和濃度，本篇文章將提供AccuSizer用于微量樣品顆粒濃度檢測的實際案例。

2介紹

單顆粒光學測量（SPOS）是一種可以提供高準確性和分辨率的顆粒大小和數量分析技術。通過讓懸浮在液體中的顆粒通過LE-400的傳感器，通過光阻擋和光散射的雙重探測器同時得到關于粒徑大小和顆粒數量的結果，通過進樣體積得到樣品的顆粒濃度，因此，在測量的過程中樣品的體積必須是確定的。本文通過測量不同體積的樣品，來驗證AccuSizer A2000 SIS對于樣品體積，顆粒大小和濃度的準確性。

3材料和方法

用于進行本技術說明中描述的所有測試的樣品是來自MML公司的 15 μm標準粒子，批號為 NK20C。該標準粒子的濃度為3,118-4,218個/毫升。所有的測量是基于美國PSS粒度儀的AccuSizer  SIS產品，使用LE-400傳感器，校準和使用的流速為15mL/min。在AccuSizer 780 A2000 SIS安裝一個1mL的注射器型進樣器，使用的測量程序如下所述：

• 在測試之前用0.5ml的清洗液進行沖洗；

• 所有測試的樣品，都取自相同規格900μl的標準樣品；

• 在抽取樣品之前的氣隙為0.05mL；

• 每次測量時注射器的凈體積為0.15mL；

測量是在以下樣品體積下進行的：650、550、450、350、250、150 和 50 μl。所有測量均進行了三次

4結果

實驗結果如下圖中的表1和下一頁中的圖1所示。

表1. 650、550、450、350、250、150 和 50 μl實驗數據

圖1. 樣品體積與顆粒數線性圖

所有濃度實驗都在顆粒計數標準的合格/不合格標準內得出結果。圖 1 中呈現的結果展示了樣品體積和計數之間預期的、良好相關的線性關系。

5結論

這項研究證明了 AccuSizer SIS 系統即使在低樣品體積下也能生成準確的大小和計數數據。雖然數據在 50 μL 時仍準確，我們建議盡可能使用稍大一些的樣品體積，以便降低操作人員的測量難度。