NEPA21高效基因轉染儀------適用于體外(In Vitro)和活體(In Vivo)

NEPA GENE公司專業研發、生產細胞電轉染儀及電融合儀等，其生產CUY21系列電轉染儀在研究領域中久負盛名，已被數百篇文獻引用，其中不乏高水平雜志的文章，如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。

2011年，NEPA GENE推出新一代全能型NEPA21高效基因轉染系統。與傳統的電轉儀相比，NEPA21采用全新設計的電轉程序，特別適用于難轉染細胞、離體組織或動物活體的轉染。配合獨有的電壓衰減（Voltage Decay）設計，NEPA21可在獲得高轉染效率的同時，提高細胞存活率。

電轉染主要特點：

• 全新的四步法電轉程序

• 特別適用于難轉染細胞、離體組織或動物活體的轉染

• 高轉染效率、高細胞存活率

• 電轉程序各項參數可見、可調，適用性廣

• 不需要特殊的轉染試劑盒輔助，運維成本低

熱點應用：受精卵\ 胚胎的基因編輯

1、體外受精卵電轉

與顯微注射相比，NEPA21特有的電極可在體外單次電擊可實現幾枚至一百多枚的受精卵基因編輯，工作效率大大提高，目前已應用于鼠卵、魚卵、爪蟾、蠶卵、絨猴等。

2、宮內胚胎電轉

3.i-GONAD 技術體內受精卵電轉

受精卵顯微注射法或體外電穿孔法， 是目前常見的KO/KI動物的方法。然而，這些技術需要費時費力的體外處理，包括受精卵分離、基因導入、體外培養、胚胎移植到孕母鼠等繁瑣復雜流程。Dr. Makoto Matsuyama實驗室開發了一種簡單高效的體內電轉方法，稱為i-GONAD，通過直接在孕鼠輸卵管壺腹部電轉染的方式完成受精卵轉染，不需要上述復雜的體外處理。目前i-GONAD法成功進行小鼠、大鼠基因編輯，也有望應用于其它哺乳動物，如豚鼠、倉鼠、牛、豬、猴等。

全新的四步法電轉程序：

一：電穿孔模式

高電壓、持續時間短、多次脈沖、電壓衰減

有效地在細胞膜上形成小孔，且對細胞損傷小

二：反向電穿孔模式

用于原位貼壁細胞/組織的轉染，有效提高穿孔率！

三：基因導入模式

低電壓、持續時間長、多次脈沖、電壓衰減

幫助目標分子（DNA或RNA等）進入細胞內，且對細胞損傷小

四：反向導入模式

獨有設計！有效提高導入效率！

應用范圍：

懸浮轉染

適用范圍：原代細胞、干細胞、以及各種難轉染細胞（如神經細胞、免疫 細胞及血液細胞等）

貼壁轉染

適用范圍：可以直接對貼壁細胞進行轉染，省去了細胞消化、再貼壁的步驟（對提高某些種類細胞的存活率十分重要）！

離體組織轉染（Ex Vivo）

適用范圍：組織切片、腦切片、器官、胚胎等

活體轉染(In Vivo)

適用范圍：大腦、視網膜、角膜、肌肉、皮膚、肝臟、腎臟、睪丸、卵巢等部分參考文獻：

• 細胞轉染儀（NEPA21、CUY21系列）：

1. Barnabe-Heider et al.Genetic manipulation of adult mouse neurogenic niches by in vivo electroporation. Nature Methods， 2008 Feb;5(2):189-96.

2. Shibata MA， et al. Combination therapy with short interfering RNA vectors against VEGF-C and VEGF-A suppresses lymph node and lung metastasis in a mouse immunocompetent mammary cancer model. Cancer Gene Ther. 2008 Dec;15(12):776-86.

3. Limura T and Pourquie O. Collinear activation of Hoxb genes during gastrulation is linked to mesoderm cell ingression.Nature， 2006 Aug 3;442(7102):568-71.

4. Sanada K and Tsai LH. G Protein betagamma Subunits and AGS3 Control Spindle Orientation and Asymmetric Cell Fate of Cerebral Cortical Progenitors. Cell， 2005 Jul 15;122(1):119-31

5. Ladher RK et al. FGF8 initiates inner ear induction in chick and mouse. Genes and Development， 2005 Mar 1;19(5):603-13.